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用这个方法处理酶联免疫试剂盒的标本,效果更好

发布时间: 2022-09-20  点击次数: 55次
  酶联免疫试剂盒实验中每一个步骤都尤为重要,细节不容忽视,它是实验成功的关键与否;在这里我司为方便各位了解,更好的完成实验,对酶联免疫试剂盒的实验原理和标本处理做出以下分析,供大家参考。

  酶联免疫试剂盒的实验原理:
  用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

  适用领域:
  1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
  2、研究抗酶抗体的合成。
  3、显现微量的免疫沉淀反应。
  4、定量检测体液中抗原或抗体成份。

  酶联免疫试剂盒的标本处理:
  1、实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2);
  2、若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本;
  3、使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差;
  4、若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况;
  5、某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出;
  6、建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。

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