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有了它,使用人胰岛素elisa试剂盒会更简单

发布时间: 2022-12-23  点击次数: 107次
  人胰岛素elisa试剂盒采用的是双抗体夹心法酶联免疫吸附检测技术(ELISA)。测定样品中人胰岛素水平。向预先包被了抗人胰岛素抗体的酶标孔中,加入标准品和样本,温育后,加入生物素标记的抗胰岛素抗体。再与HRP标记的链霉亲和素结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入显色底物TMB,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。最后,在450nm处测定反应孔样品吸光度(OD)值,样本中的人胰岛素浓度与OD值成正比,通过绘制标准曲线计算出样本中人胰岛素的浓度。
 
  人胰岛素elisa试剂盒的使用方法:
  人胰岛素elisa试剂盒样品收集、处理及保存方法应用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入抗体,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
 
  1、血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
  2、血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
  3、细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
  5、保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
 
  自备物品:
  1、酶标仪(450nm)
  2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
  3、37℃恒温箱

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