技术文章 / article 您的位置:网站首页 > 技术文章 > 分享使用人elisa试剂盒的详细步骤

分享使用人elisa试剂盒的详细步骤

发布时间: 2023-04-18  点击次数: 732次
  ELISA(酶联免疫吸附实验)是一种广泛用于生物医学研究和临床诊断的技术。人elisa试剂盒是一套预先包装好的组件,用于检测特定蛋白质或其他分子在样本中的存在量。下面是使用人elisa试剂盒的详细步骤:
 

 

  步骤1:收集样本
  首先需要收集待测试的样本。这可以是血液、尿液、唾液等生物样本。将样本放入试管中,并将其标记以避免与其他样本混淆。
 
  步骤2:稀释样本
  对于某些样本,如血清和血浆,需要进行稀释。这是为了确保样本中含有足够低的蛋白质浓度,以避免在后续步骤中出现假阳性结果。通常会用缓冲液稀释样品,使得样品能够被人elisa试剂盒所检测。
 
  步骤3:装载试板
  将96孔板插入孔板支架中,并将每个孔加入要测试的样本或标准品。每个孔位都需要添加适量的绑定抗体,并进行孵育反应。
 
  步骤4:孵育
  将孔板放入温度控制器中,一般会将其孵育30-60分钟,以便样本中的蛋白质与绑定抗体结合。在此过程中,可以通过轻轻震动微板使物质更充分地混合。
 
  步骤5:洗涤
  使用缓冲液或PBS洗涤孔板,去除不结合的物质。通常需要洗涤2-5次,以确保所有不结合的物质都已被清除。
 
  步骤6:加入检测抗体
  将检测抗体添加到每个孔位中,并进行孵育反应。此抗体将与之前的绑定抗体结合,并形成一个复合物。这个复合物是将要检测的蛋白质、抗原或其他生物分子的检测目标。
 
  步骤7:再次洗涤
  使用缓冲液或PBS洗涤孔板,去除不结合的物质。
 
  步骤8:加入底物
  将底物HRP(过氧化物酶)添加到每个孔位中,并进行孵育反应。复合物将与底物发生反应,产生颜色变化的信号。
 
  步骤9:终止反应
  在可见的颜色出现之前,及时添加停止反应的缓冲液。这会阻止进一步产生颜色,并稳定复合物的信号。
 
  步骤10:测量信号
  使用读数器或多光谱分析仪测量每个孔位的吸光度。吸光度与蛋白质、抗原或其他生物分子的存在量成正比。根据标准曲线计算样品中蛋白质的含量。
 
  人elisa试剂盒是一种用于检测特定生物分子的快速、灵敏和可靠的方法。通过遵循以上步骤,可以使用人elisa试剂盒进行高质量的实验并得到准确的结果。