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在使用人elisa试剂盒前,这些要领一定要知道

发布时间: 2022-11-28  点击次数: 594次
  人elisa试剂盒具有高效、快捷、易批量操作等优点,不同的厂家提供不同种类,不同类型的Elisa试剂盒产品,为科研用户带来极大的方便。人elisa试剂盒能够针对特定检测源,制备特异性抗原抗体,根据应用需要量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。
 
  实验原理:
  人elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入待测物质,再与HRP标记的待测物质抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
 
  人elisa试剂盒的计算:
  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
 
  人elisa试剂盒在使用时的要领:
  1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  2、浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  3、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间醉好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  4、请每次测定的同时做标准曲线,醉好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第—孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请醉后乘以总稀释倍数(×n×5)。
  5、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6、底物请避光保存。
  7、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
  8、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
  9、本试剂不同批号组分不得混用。
  10、如与英文说明书有异,以英文说明书为准。