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解析!动物elisa试剂盒的关键试验步骤

发布时间: 2023-01-28  点击次数: 308次
  在动物elisa试剂盒实验的时候,我们经常会遇到样品浓度接近试剂盒的灵敏度,容易发生样本OD450值低于空白值的现象,特别是在血清和血浆样本中。这就有可能是基质效应导致的结果。基质是指样品中目标分析物以外的部分。由于基质成分会对分析过程有显著干扰,影响分析结果的准确性。业内把这些影响统称为基质效应。这是开发和使用中需要避开的雷。
 
  下面咱们来说下动物elisa试剂盒的关键试验步骤:
  1、重要的洗刷:
  如果洗刷不充分,会形成一系列的差异和高布景冬导致试验成果偏差大。如果未结合的材料残留在微孔板中,那么它会添加布景噪音。条件答应的情况下,恰当添加洗刷液中的盐浓度,这会阻挠非特异结合反响。如果布景过高,置疑洗刷不行时,能够测验添加洗刷次数。
  2、关键的关闭:
  关闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的时机。如果布景过高,置疑关闭不充分,那么能够测验运用更高浓度的关闭液,或恰当延长关闭时刻现在主要有两种类型的关闭液,蛋白和非离子型去污剂。运用的类型须取决于多个要素,包含微孔板的外表试剂、吸附的抗原、抗体和检测试剂。好的关闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。
  3、抗体浓度须优化:
  如果试剂稍有不同,则可能需求优化抗体的量。非特异的抗体结合会添加布景。为了防止这一点,切勿运用过多的一抗或二抗。
  4、检测试剂要适量:
  必定不能够运用过多的检测试剂。如果浓度过高,或许未正确稀释,则会导致高布景。也不要显色过度,如有必要,优化一下何时应加入停止液。