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BL21 Star(DE3)感受态细胞

BL21 Star(DE3)感受态细胞

简要描述:BL21 Star(DE3)感受态细胞
BL21 Star(DE3)菌株源于BL21(DE3)菌株,含有rne131突变(RNaseE基因),RNaseE基因的突变降低了內源RNase的积累,增强菌株细胞内mRNA的稳定性,从而提高异源蛋白的表达水平。

更新时间:2022-01-20

厂商性质:生产厂家

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详情介绍
品牌自营品牌货号BFNC86070
规格10x100ul/50x100ul供货周期现货
主要用途仅用于科研应用领域医疗卫生,生物产业

BL21 Star(DE3)感受态细胞



产品规格CAT#: BFNC86070-01(10×100ul)/BFNC86070-02(50×100ul)


BL21 Star(DE3):                                        100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                    10μl

保存条件(保质期):                             -80℃(6个月)




基因型

F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm rne131 (DE3)


产品说明

BL21 Star(DE3)菌株源于BL21(DE3)菌株,含有rne131突变(RNaseE基因),RNaseE基因的突变降低了內源RNase的积累,增强菌株细胞内mRNA的稳定性,从而提高异源蛋白的表达水平。主要适用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达,同时含有大肠杆菌RNA聚合酶,也可用于非T7启动子表达载体(pGEX,pMAL等)的蛋白表达。由于BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高,所以不适合毒性蛋白的表达。

青旗生物生产的BL21 Star(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg DNA。


操作方法

1. BL21 Star(DE3) 感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手bo打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。

2.  42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4.  5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。


BL21 Star(DE3)感受态细胞


IPTG

Prepare a 1 M solution of IPTG (Isopropyl-β-D-thiogalactoside; Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside) by

dissolving 2.38 g of IPTG in dd water and adjust the final volume to 10 ml. Filter sterilize before use.


注意事项

1. 感受态细胞尽量 在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。

4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

5. 为获得需要量的蛋白,诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。




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