产品展示 / products 您的位置:网站首页 > 产品展示 > 感受态细胞 > 表达感受态细胞 > Tuner(DE3)感受态细胞
Tuner(DE3)感受态细胞

Tuner(DE3)感受态细胞

简要描述:Tuner(DE3)感受态细胞
Tuner(DE3)菌株是BL21菌株的lacZY基因 (半乳糖苷透性酶基因)突变株,此突变导致IPTG以均一速度进入体系中大肠杆菌的每个细胞,产生更加严格、均一的浓度依赖。

更新时间:2022-01-20

厂商性质:生产厂家

浏览次数:200

详情介绍
品牌自营品牌货号BFNC86083
规格10x100ul/50x100ul供货周期现货
主要用途仅用于科研应用领域医疗卫生,生物产业

Tuner(DE3)感受态细胞


产品规格CAT#: BFNC86083-01(10×100ul)/BFNC86083-02(50×100ul)


Tuner(DE3):                                              100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                    10μl

保存条件(保质期):                             -80℃(6个月)



基因型


F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm lacY1 (DE3)



产品说明

Tuner(DE3)菌株是BL21菌株的lacZY基因 (半乳糖苷透性酶基因)突变株,此突变导致IPTG以均一速度进入体系中大肠杆菌的每个细胞,产生更加严格、均一的浓度依赖。此菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体 (如pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶,该区整合于Tuner的染色体上,所以称为Tuner(DE3),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。

青旗生物生产的Tuner(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达107 cfu/μg DNA。




操作方法

1.Tuner(DE3)感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手bo打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。


Tuner(DE3)感受态细胞


IPTG

Prepare a 1 M solution of IPTG (Isopropyl-β-D-thiogalactoside; Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside) by

dissolving 2.38 g of IPTG in dd water and adjust the final volume to 10 ml. Filter sterilize before use.


注意事项

1. 感受态细胞尽量在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。

4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

5. 为获得需要量的蛋白,诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。




留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7

联系我们

contact us

咨询电话

4006560232

扫一扫,关注我们

返回顶部