IgG2b抗体亚型ELISA试剂盒

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（Enzyme Linked-Immuno-Sorbent Assay, ELISA）。往预先包被小鼠IgG2b抗体亚型抗体的包被酶标板孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠IgG2b抗体亚型呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成

注:使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致

试剂盒性能

1. 样品线性回归与预期浓度相关系数R值为95以上。
2. 批内变异系数与批间变异系数应小于10%。

需自备的试剂盒器材

1. 标准规格酶标仪
2. 37℃恒温箱
3. 系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，最好用多通道移液器
4. 去离子水，用来稀释洗涤缓冲液
5. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，室温血液自然凝固10 - 20分钟，2000 - 3000 rpm离心20分钟，将血清和红细胞迅速小心地分离，收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
6. 血浆：根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂。混合10 - 20分钟后，2000 - 3000 rpm离心20分钟。收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
7. 细胞上清液：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。 2000 - 3000 rpm离心20分钟，收集上清。
8. 组织匀浆：标本采集后用液氮迅速冷冻保存备用。使用时取适量标本，加入一定量的 PBS，用手工或匀浆器将标本匀浆充分后，2000 - 3000 rpm离心20分钟，收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
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   IgG2b抗体亚型ELISA试剂盒
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