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大鼠白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒

大鼠白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒

简要描述:本试剂仅供研究使用
产品名称:大鼠白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒
目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆、组 织匀浆及相关液体样本中白细胞介素10的含量。

更新时间:2021-01-28

厂商性质:生产厂家

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详情介绍
品牌其他品牌货号BFNE85641
规格48T/96T供货周期现货
主要用途仅用于科研应用领域生物产业
产品名称:大鼠白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒
样本处理及要求:
1.血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收 集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
 
操作步骤
1.标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL;。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl(样品终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.加酶:每孔加入酶标试剂 100μl,空白孔除外。
4.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 60 分钟。
5.配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用。
6.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
7.显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
8.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9.测定:以空白孔调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
 
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡 60 分钟。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间尽量控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,尽量做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔第one孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
 

试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值为 0.95 以上。
2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于10%和15% 。


检测范围:
2 pg/mL -64 pg/mL


灵敏度:
di检测浓度小于 0.1 pg/mL


保存条件及有效期: 
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月

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