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上海elisa试剂盒是如何进行操作的?

发布时间: 2022-11-26  点击次数: 138次
  上海elisa试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在植物学检验的各领域中。
 
  上海elisa试剂盒的技术关键:
  1、细胞上清:前处理有必要把细胞离心去掉,每孔直接加100μl即可。假定浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释;
  2、脑脊液:前处理有必要把细胞离心去掉,每孔直接加100μl即可。假定浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释;
  3、血清血浆:请参与50ul样本分析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本分析缓冲液等量参与,缺少部分用标准品稀释液赔偿至100ul;
  4、组织匀浆液的样本,要制备过程中需要在缓冲液中参与蛋白酶抑制剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解,构成查看效果的值偏低。
 
  上海elisa试剂盒的实验操作步骤:
  1、把试剂混匀,切记实验时不要加理大量含有泡沫的液体,避免实验产生误差。
  2、跟数据测样决定板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
  3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔 加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
  4、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
  6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  7、每孔加入底物各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。一定要避免光照。
  8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
  9、在450nm波长处测定各孔的OD值。

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